显微镜的几个概念:分辨率,放大率,最大分辨率,分辨极限 一、分辨率
分辨率是指能够分辨出的相邻两个物点间的最小距离的能力,这种距离称为分辨距离。
一般来说分辨距离越小,分辨率越高。一般规定:显微镜或者人眼在25cm处明视距离处,能够清楚分辨被检物体细微结构最小间隔的能力,称为分辨率。人眼的分辨距离是100μm;光学显微镜的最大分辨距离是0.2μm。分辨距离(r)可用以下的公式计算:
r = 0.61 λ/n sinα 其中:n为聚光镜和物镜之间介质的折射率(空气的折射率为1,油为1.5)α为样品对物镜角孔径的半角,sinα的最大值为1λ为照明光源的波长;0.61是一个恒定参数
上式中的n sinα的值称为物镜的数值孔径(numerical aperture),缩写NA。各种物镜和聚光镜的数值孔径是不同的,干燥系物镜NA为0.05~0.95,油镜的NA为0.85~1.4。值得注意的是分辨率指的是分辨能力,而r值指的是分辨距离,因此r值越小对应的分辨率越高。
二、最大分辨率
根据分辨率的定义可知,当r值越小的时候,分辨率越高。根据公式可得当NA的值越大,r值越小,分辨率也就越高。因此当以可见光作为光源时,我们就可以计算出透镜的最大分辨率是多少。
要想使得分辨距离尽可能的小,一方面是使得数值孔径NA尽可能大,好的玻璃透镜的镜口角大约为70°,空气折射率为1,因此NA大约为0.94。另一方面可以缩短波长,可见光的波长范围为400~700nm,以450nm的蓝光,空气作为介质为例,其最大分辨距离为r=0.61×450/1×0.94≈0.3μm;若选择油镜作为光折射的介质,则最大分辨距离可提高到0.2μm。
三、分辨极限和放大率
显微镜的分辨极限受可见光波长的限制,无论怎样改善透镜,也不可能克服波长本身所造成的限制。普通光学显微镜下,能够清楚分辨的相邻两点之间的最小距离为0.2μm,称为光镜的分辨极限。
最终成像的大小和原物体大小的比值称为放大率,在显微镜中总的放大率等于物镜放大倍数乘以目镜的倍数,放大倍数同样受分辨极限的限制。一般来说,光镜的最大放大率只能是透镜数值孔径的一千倍。空气作为介质时,最大放大倍数大约为1000倍。
四、注意事项
文中所提到的分辨率实际上是指分辨能力,有些资料当中也使用分辨力一词。计算分辨距离时,α指的是物镜角孔径的半角,有些材料直接当作角孔径,因此在计算的过程中要除以2。最大分辨率等同于最小的分辨距离,通俗的讲就是看的最清楚,切记不要混淆概念。文中所有的数值均为约数,数据只是作为例子,便于理解。
研究人员开发了一种名为 ULA-SNOM 的新型成像技术。该技术将银质扫描针尖置于超高真空和超低温条件下,用以探测单个原子最细微的结构细节。 长久以来,显微镜一直是科学家观察微观世界的眼睛,揭示了从繁忙的细胞到病毒乃至纳米结构的万物。 然而,即使最强大的光学显微镜也一直受制于一个基本的物理规则——衍射极限。该限制使它们无法清晰观测小于约 200 纳米的物体 —— 这个尺寸远大于单个原子,因此无法捕捉原子图像。 这一限制阻碍了科学家观察光如何与单个原子或分子相互作用,而这对推进材料科学、电子学和量子研究至关重要。 如今,一个国际研究团队克服了这一挑战。他们开发了一种名为 ULA-SNOM(超低针尖振荡幅度散射型扫描近场光学显微镜)的新型成像技术。该技术能够以光学方式分辨小至 1 纳米的结构特征 —— 这个尺度足以用光看到单个原子。 简而言之,科学家们开发出了一种光学显微镜,使我们能够观察光在单原子层面的行为 —— 这一成就曾被认为只有基于电子的显微镜工具才能实现。 这一突破可能彻底革新我们在基本层面研究物质的方式,并重塑从太阳能电池的制造方式到我们对化学反应和量子系统的理解等方方面面。 将光压缩至原子尺寸 为了突破传统光学显微镜的分辨率限制,该团队在一种名为散射型扫描近场光学显微镜(s-SNOM)的技术基础上进行了改进。在 s-SNOM 中,一个尖锐的金属针尖被激光照射,并在材料表面进行扫描。 光从表面散射形成图案,揭示纳米尺度的细节。然而,典型的 s-SNOM 装置仅能达到约 10 到 100 纳米的分辨率,这对于原子尺度的成像来说仍然太大。 研究人员利用他们新颖的 ULA-SNOM 方法,成功将扫描针尖的运动减小到极其微小的程度。在该方法中,针尖仅以 0.5 到 1 纳米的振幅(大约相当于三个原子的宽度)进行振荡。 研究发现,这种精确的运动幅度足以拾取光学信号,同时又足够小,能够探测到最精细的结构细节。振幅过大会降低光学分辨率,而过小则会使信号被噪声淹没。 针尖本身由抛光的银制成,并使用聚焦离子束精心塑形,以确保表面光滑稳定。一束波长为 633 纳米、功率为 6 毫瓦的可见红色激光被引导照射在针尖上,产生了一种称为“等离激元腔体”(plasmonic cavity)的现象 —— 这是在针尖和样品表面之间形成的一个微小、受限的光囊。 该腔体被压缩至仅 1 立方纳米的体积,使其能够在单原子尺度上与材料相互作用。为了保持这一精密装置的稳定性,整个实验在超高真空和 8 开尔文(零下 265 摄氏度)的超低温条件下进行。 这些低温条件消除了振动和污染,帮助针尖稳定地保持在距离表面仅一纳米的位置。接着,为了滤除背景光并增强真实信号,团队使用了一种名为“自零差检测”(self-homodyne detection)的专门方法,使光学数据更清晰、更可靠。至此,ULA-SNOM 显微镜装置已准备就绪,可以进行测试。 捕获原子尺度的图像 该团队使用他们的 ULA-SNOM 装置对放置在银基底上的单原子层厚硅岛进行了成像。尽管这些硅层仅有一个原子高,但显微镜不仅能够清晰地显示出硅结束和银开始的位置(形状),还能显示出每种材料对光的响应特性。 这一结果证实了该系统能够在原子分辨率下捕获真实的光学对比度。该显微镜还提供了独特的功能:它能够同时收集不同类型的信息。 除了光学信号外,该装置还利用内置的扫描隧道显微镜(STM)和原子力显微镜(AFM)功能测量了电导率和机械力。 此外,通过分析针尖在不同振动频率(谐波)下的响应,团队能够区分来自不同来源的信号。特别是第四谐波,最能清晰地揭示不同材料之间光学行为的差异。 当科学家们将 ULA-SNOM 的空间分辨率与传统的 STM(一种用于原子尺度表面成像的强大仪器)进行比较时,他们发现 ULA-SNOM 的光学图像达到了与之相当的细节水平,约为一纳米分辨率,几乎与 STM 的 0.9 纳米分辨率相同。 意义与前景 研究人员首次能够清晰地看到单个原子或缺陷如何影响材料的光学行为。这项发展可能带来电子学中纳米结构的精确设计、新型光子材料的发现,甚至制造出能更高效吸收光能的太阳能电池。 此外,科学家们可以利用这项技术以前所未有的细节水平研究量子点、单分子传感器或生物结构。 挑战与未来 然而,ULA-SNOM 需要低温冷却、超高真空、精心塑形的金属针尖和稳定的激光系统,这些设备目前只能在专业实验室获得。希望未来的研究能致力于使该方法更具实用性、可及性和可扩展性。 该研究已发表在《科学进展》期刊上。 微镜的未来进步做出了贡献。
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